■ QLS-Scope多角度光片成像在小鼠心脏成像中的应用
QLS-Scope显微镜具备SPIM-OPT成像模式,通过逐渐旋转样品并在每个层面进行快速SPIM扫描来收集360度光学数据。软件将不同的角度视图重建成一个单一的数据集。这一特性对于从数据中获得具有代表性的3D重建图像非常重要。
如图所示,比较了Single-SPIM、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三种方式的成像效果。第一行显示基于Single-SPIM、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三者获得的数据的表面渲染图的背侧面。Single-SPIM成像方式的图例可见,由于缺少来自最底层区域的成像信息,最终得到渲染不完整图像。Multiple-SPIM成像方式,从另外一个角度集成光学数据在一定程度上可提高图像质量。需要特别注意的是SPIM-OPT成像结果中颜色深度的增加范围最大,这样就意味着可以得到更高分辨率的重构图像。SPIM-OPT渲染无空白、无死角,从所有角度成像都可以提取光学数据,即使是透明化程度不是最优化的样本也能得到较好的图像效果。第二行显示从相同数据集计算的正交视图。再次证明了,从多个角度进行组合和重建可以显著提高Z分辨率和质量。
QLS-Scope显微镜软件操作的简单性和高扫描速度有助于为每个样本选择和应用合适的成像模式,当您的样本透明化较好时候,可以节约时间的Single-SPIM、Multiple-SPIM等扫描模式;另外,您也可以选择SPIM-OPT模式,以获得更加高Z轴分辨率的高质量的样本图片结果。

图1 Single-SPIM、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三种方式的成像效果图(分别为左列、中列、右列)。第一行显示三种方式成像后表面渲染图的背侧面。第二行显示三种不同模式的样本的正交视图。结果显示,随着软件将重建的附加角度增加,模型的分辨率和清晰度显著的提高了(Scale bars 1 mm)。
■ QLS-Scope三维成像在拟南芥根系基因表达分析中的应用
光片显微镜的使用可以在不干扰根系生长、破坏无菌或中断实验的情况下实时观察根系。QLS-Scope三维成像具有高分辨率、优化的光学特性。QLS-Scope的高速和简单性来沿着其3D路径跟踪根系生长。下图显示了在生长顶端和沿着中柱表达atHB8驱动的GFP的根。这些测量是在一个体积为2.2*3.1*0.6毫米(4.1毫米3)的单SPIM中进行的,只需45秒即可完成,从而缩短了设备分析和潜在实验改变的时间。此外,在生长培养基中添加稀释的染色剂不会导致背景增加或明显的生长变化。

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